В одном сорте кофе обнаружены антидиабетические элементы

27.08.2025

Предложенная схема состоит из трёх шагов. На первом этапе субфракционные образцы подверглись исследованию методом протонного ядерного магнитного резонанса (1H-NMR) и оценке активности. Применялся кластерный тепловой картографический метод группировки данных 1H-NMR и активности, позволяющий выявить группы активных соединений. На втором шаге фракции интересующих образцов были проанализированы методом углеродного поляризационного переноса без искажения интенсивности спектра (13C-DEPT NMR). Фракции, содержащие потенциально новые активные соединения, очистили полуаналитической HPLC.

Изолированные соединения дополнительно оценили методами двумерного NMR и высокочувствительной электрораспылительной масс-спектрометрии (HRESIMS), подтвердив их функциональную значимость. Третий этап включал молекулярный сетевой анализ на основе LC-MS/MS для изучения следов других активных соединений.

Результаты

В ходе исследования экстракт дитерпенов обжаренного кофе методом колоночной хроматографии на силикагеле разделяли на 19 фракций. Спектры 1H-NMR каждой фракции изучались для вычисления интегральных значений характерных областей. Полученный матричный кластерный тепловизионный график состоял из 19 строк и 1167 столбцов.

По результатам кластерного анализа, основанного на данных 1H-NMR, фракции распределились на пять групп. Так как группа фракций Fr.1-Fr.3 не проявила никаких признаков активности в подавлении альфа-глюкозидазы, дальнейший анализ этих фракций был прекращён. Среди четырёх оставшихся групп наибольшую активность в подавлении альфа-глюкозидазы показала группа фракций Fr.9-Fr.13.

Объединённый анализ данных кластерного тепловизионного графика и спектров 1H-NMR подтвердил наличие в группе фракций Fr.9-Fr.13 соединений, обладающих способностью подавлять альфа-глюкозидазу. Затем образец фракции Fr.9, представляющий активную группу (Fr.9-Fr.13), исследовался с использованием метода 13C-DEPT NMR, который показал присутствие специфичного карбонильного сигнала альдегидных групп. Анализ образца фракции Fr.9 методом HPLC позволил выявить три хроматографические пика. Полупрепаративная HPLC позволила очистить полученные соединения, получив соединения №1-№3.

Спектр 1H-NMR указал на наличие двух метильных групп, одной окислённой метиленовой группы, трех олефиновых протонов и одной альдегидной протонной группы. Данные 13C-DEPT NMR подтвердили наличие суммарно 36 атомов углерода. Метод 13C NMR показал, что соединение №1 представляет собой дитерпеновый эфир с шестнадцатью насыщенными жирнокислотными карбонами.

Хотя спектральные данные 1H-NMR и 13C NMR соединений №2 и №3 аналогичны соединению №1, согласно данным 13C NMR и HRESIMS, соединение №2 обладает двумя дополнительными метиленовыми группами, а соединение №3 имеет четыре дополнительные метиленовые группы в длинной цепи жирной кислоты по сравнению с соединением №1. Важно отметить, что соединения №1-№3 фракции Fr.9 проявляли активность ингибиторов альфа-глюкозидазы.